關于進一步規(guī)范保健品原料管理的通知》〔衛(wèi)法監(jiān)發(fā) (2002)51 號〕把人參(包括人參、人參葉、人參果)列 入可用保健品食品原料的名單后,人參根、莖、葉正式 作為保健品原料使用。目前,市場上人參類的保健品 已有上百種,包括人參酒、人參茶、人參口服液、人參膠 囊、人參含片等。2012 年,衛(wèi)生部批準人參可以作為 新資源食品使用后,人參根、莖、葉在食品、保健品的 應用將有更廣闊的前景。
1 材料與試劑
1.1 材料
在撫松縣榆樹鄉(xiāng)參場,隨機選取6 個樣品采摘點, 每個點隨機抽取 5 組 6 年生人參的根、莖、葉作為試驗材料。共計 30 組人參根、莖、葉樣品。
1.2 試劑
EDTA(意大利 VELP 公司)。
1.3 儀器
NDA701杜馬斯定氮儀(意大利VELP公司);Milli-Q Advantage A10 型超純水器(美國密理博公司); 上海一恒DZF-6053臺式真空干燥箱;MS204S 型天平電子分析天平; S205DU電子天平(瑞士梅特勒托利多儀器有限公司)。
2 方法與結(jié)果
2.1 儀器工作條件
當燃燒反應器溫度達 1 030 ℃以上、還原反應器 溫度達 650 ℃以上、氦氣(純度≥99.99%)壓力達 200 kPa 以上、氧氣(純度≥99.99%)壓力達 250 kPa 以 上及氮氣(純度≥99.99%)壓力達 300 kPa 以上時,自 動進樣檢測。
2.2 標準曲線線性關系和標準曲線方程
分別稱取 EDTA 標品 0、12.2、21.7、30.1、41.2、 52.8、62.4、75.4、82.4、93.3、100.3、113.6、122.6 mg,用 錫箔紙包好,經(jīng)制樣器制樣后檢測,繪制標準曲線。以 總氮質(zhì)量(mg)為橫坐標、峰面積(mv×s)為縱坐標繪制 標準曲線。曲線方程: Y=4.373 955E 3+X×2.935 245E-4,R2=0.999 97。
2.3 樣品制備
鮮參樣品經(jīng)洗刷瀝水后置于 50 ℃烘箱內(nèi)干燥,粉 碎后過 80 目篩,密封留存待用。以 EDTA 作為檢測時 的標準物質(zhì)。在測定前,所有樣品以及 EDTA 標準物 質(zhì)均在 70 ℃烘箱內(nèi)再次干燥 72 h,置于干燥器內(nèi),待測。準確稱取干粉樣品,用錫箔紙包好,壓縮空氣。
2.4 儀器精密度
以標準品 EDTA 作為樣品,在上述測定條件下連 續(xù)測定 11 次,RSD 值為 0.317%(n=11),結(jié)果表明,儀 器精密度良好。
2.5 重復性
隨機選取一個樣品的根、莖、葉,分別重復測定 6 次,統(tǒng)計分析結(jié)果,數(shù)據(jù)均符合 X∈X±2s,根蛋白質(zhì)含 量的平均值為 15.851%,RSD 為 0.322%;莖蛋白質(zhì)含 量的平均值為 8.561%,RSD為 0.341%;葉蛋白質(zhì)含量 的平均值為 12.704%,RSD 為 0.326%。說明該試驗方 法的重現(xiàn)性良好。
2.6 加樣回收率
取已知含量的人參根、莖、葉粉末作為樣品,各稱 取 2 個樣,分別加入EDTA0.8、2.4、4.6、7.2、9.0、10.4mg。 制樣后按照“2.1”項下條件測定,統(tǒng)計結(jié)果,平均回收 率達 99.83%。
2.7 樣品含量測定
30 組樣品制備完成后,置于自動進樣盤上。按照 “2.1”項下條件進行蛋白質(zhì)含量測定,每個樣品平行測 定 3 次。采用杜馬斯定氮儀可自動計算出含氮量,運 用公式蛋白質(zhì)含量=含氮量×6.25 計算出蛋白質(zhì)含量, 蛋白質(zhì)含量為 3 次平行測定的平均值。利用 Excel 及 SAS 9.2 統(tǒng)計系統(tǒng)中的單因素方差分析程序?qū)Φ鞍?質(zhì)含量進行方差分析和單因素比較。
2.7.1 樣品點間蛋白質(zhì)含量比較
6 個樣品組間根、 莖中蛋白質(zhì)含量無顯著差異;葉中樣品 1、4、5、6 間無 顯著差異,但顯著高于樣品 2,樣品 1、3、4、5 間無顯著 差異,樣品 2、3 間無顯著差異(表 1)。
2.7.2 不同部位蛋白質(zhì)含量比較
將每個樣點間的人 參根、莖、葉蛋白質(zhì)含量進行比較(圖 1)發(fā)現(xiàn),除樣點 5 外,其余樣點根、莖、葉蛋白質(zhì)含量均存在顯著差異, 表現(xiàn)為根>葉>莖;樣點 5 根、葉中蛋白質(zhì)含量顯著高 于莖,根與葉的蛋白質(zhì)含量無顯著差異;根部蛋白質(zhì)含量為 14%~15%,莖部蛋白質(zhì)含量為6%~8%,葉部蛋白 質(zhì)含量為10%~14%,根部蛋白質(zhì)含量顯著高于葉部蛋 白質(zhì)含量,葉部蛋白質(zhì)含量顯著高于莖部蛋白質(zhì)含量; 根部與莖部蛋白質(zhì)含量在不同樣點間較穩(wěn)定,葉部蛋 白質(zhì)含量在不同樣點間變化較大。
3 討論
試驗結(jié)果表明,6 個采樣點間人參根和莖的蛋白 含量無顯著差異,而 6 個采樣點間葉部蛋白質(zhì)含量差 異顯著,可能是由于葉片為采樣時期的主要生長組織, 各植株生長狀態(tài)有所不同,也可能是光照等環(huán)境因素 造成的;而任一組內(nèi)蛋白質(zhì)含量個體之間無顯著差異; 但同一人參樣品的根、莖、葉間存在顯著差異。
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